近年、様々な界面選択的な分光法が開発されています。本年度の発展編では、界面選択的な分光法のうち、取り扱いが比較的容易であり、高感度なために光学顕微鏡と組み合わせることが可能な全内部反射レーザー励起顕微蛍光分光法を取り上げます。全内部反射法は、界面近傍に生じるエバネッセント波（深さ約100 nm）の強度が、界面からの距離に対して指数関数的に減少することを利用した分光法です。
　本発展編では、まず同法を理解するための基礎となる幾何光学やフレネル係数、エバネッセント波の特徴、さらには光学顕微鏡の原理等について解説します。また、全内部反射分光法を用いた応用例について紹介します。その後、実際に全内部反射レーザー励起顕微蛍光分光法の装置に触れて頂き、光学系の調整から単一蛍光微粒子の蛍光測定までを挑戦していただきます。